土壤脲酶 (S-UE) 活性检测试剂盒说明书 |
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详细介绍 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
土壤脲酶 (S-UE) 活性检测试剂盒说明书 微量法 注意:正式测定之前选择预期差异大的样本做预测定。 规格:100T/48S 产品内容: 试剂一: 甲苯2mL×1 瓶,4℃保存; (自备) 试剂二:粉剂×1 瓶,临用前加入9mL 蒸馏水,充分溶解待用,4℃保存;用不完的试剂4℃保 存; 试剂三:液体19mL×1 瓶,4℃保存; 试剂四A 液:液体0.4mL×1 支,4℃保存; 试剂四B 液:液体1.6mL×1 瓶,4℃保存;临用前将A 液倒入B 液中混合,待用;用不完的试 剂4℃保存一周; 试剂五:液体 2mL×1 瓶,4℃保存; 标准品:液体 1mL×1 支,1mg/mL 氮标准液。 产品说明: S-UE能够水解尿素,产生氨和碳酸。土壤脲酶活性与土壤的微生物数量、有机物质含量、 全氮和速效氮含量呈正相关。土壤脲酶活性反应了土壤的氮素状况。利用靛酚蓝比色法测定脲酶水 解尿素产生的NH3-N。 需自备的仪器和用品: 可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、研钵、冰、甲苯 (不允许快递) 和蒸馏水。 操作步骤: a. 培养
b. 将培养结束的上清液稀释10 倍 (取0. 1mL 上清液,加入0.9mL 蒸馏水) 。若最终计算得到的 ΔA仍大于0.5继续稀释。 c. 标准品的准备:吸取适量的标准溶液,稀释至10 、8 、6 、4 、2 、1 、0.5 、0μg/mL。 d. 测氨量 (在微量玻璃比色皿或96 孔板中加入下列试剂)
混匀,于 630nm 处,蒸馏水调零,读吸光值 A ,计算ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管设一 个对照管。标准曲线的建立:根据标准管的浓度 (y) 和吸光度 ( x,减去浓度为 0 的空白管) ,做标 准曲线。 脲酶活力计算 根据标准曲线,将ΔA带入公式 (x ) 计算测定中样品的浓度 (μg/mL) y值。 单位的定义:每天每g土样中产生1μgNH3-N定义为一个酶活力单位。 脲酶活力 (U/g 土样) =y×10×V反总÷W÷T=60×y 10:稀释倍数;T :反应时间,1d;V反总:反应体系总体积,0.3mL;W:样本质量,0.05g。 从2011年开始我们致力于在生命科学领域、生物医学实验外包及论文润色服务,协助客户各类实验服务及论文润色十多年,是您值得信赖的科研合作伙伴! 如果您受时间、试验条件等限制而无法完成您的课题研究,欢迎您与我们联系。
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