蛋白银染试剂盒说明书

Protein Silver Stain Kit

蛋白银染试剂盒

目录号：K2012

保存条件：室温保存。

组分说明

      Cat. No.                     K2012

    Kit Size                       20次

   Silver Stain Sensitizer（500×）      2×1 ml

   Silver Stain Enhancer              3ml

  Silver Stain                     2×250 ml

 Silver Stain Developer            4×125 ml

产品简介

　　本试剂盒采用高灵敏度的银染染料，可应用于变性胶及非变性胶的蛋白染色，具

有目的条带清晰、背景低，操作时间可灵活控制的优点。另外，本试剂盒增加了一步

短时敏化作用步骤，可明显降低背景及提升目的条带的亮度。

注意事项

1．操作时请使用去离子水和洁净的玻璃或塑料器皿，须戴一次性手套进行操作。

2．整个银染过程需在摇床上进行，摇床转速约60 rpm左右。

3．需自备乙醇，冰醋酸。

本产品仅供科研使用，请勿用于临床诊断及其他用途

使用说明

  以下操作步骤中各溶液的用量以大小为8.5×5.5 cm、厚度为1.0 mm的凝胶为例，以凝胶全部浸没到溶液为准，一般用量25 ml。对于大型凝胶，各溶液的使用量需按凝胶体

积的比列放大。请提前准备好50 ml固定液（超纯水：乙醇：冰醋酸=6:3:1）、50 ml洗脱液（10%乙醇）和50 ml终止液（5%的冰醋酸）。

1．水洗：电泳完成后，用超纯水洗胶2次，每次洗涤5分钟。

2．固定：用25 ml固定液固定凝胶2次，每次固定15分钟。

3．洗脱：固定完成后用洗脱液洗胶2次，每次洗涤5分钟。

4．水洗：用超纯水洗胶2次，每次洗涤5分钟。

5．增敏：将上一步洗好的凝胶置于银染增敏工作液中，室温下准确孵育1分钟后用超纯水洗胶3次，每次洗涤20秒。

     银染增敏工作液的配制：取50 µl Silver Stain Sensitizer（500×）加入到25 ml超纯水中，混匀。

6．银染：弃去超纯水，将凝胶置于银染工作液中孵育30分钟。

银染工作液的配制：取25ml Silver Stain加入50 µl Silver Stain Enhancer混匀。

7．水洗：用超纯水快速洗胶2次，每次洗涤准确控制为20秒。

8．显影：立即将洗好的凝胶浸没在显影液中，室温孵育2-3分钟，直至蛋白条带显示清晰。

  显影液的配制：取25ml Silver Stain Developer加入30µl Silver Stain Enhancer混匀。

注意：显影30秒内，蛋白条带开始显现，继续显影至2-3分钟。若蛋白条带显色较浅，可适当延长显影时间至5分钟及以上。

9．终止：用终止液洗去凝胶上的显影液后，将凝胶浸泡在新的终止液中反应10分钟。

实验代做服务：